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增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）是一種在DNA復(fù)制過(guò)程中至關(guān)重要的蛋白質(zhì)，它通過(guò)包裹DNA，將DNA聚合酶（Pols）固定在DNA上，以提高其合成效率。在DNA復(fù)制中，Ctf18-RFC（復(fù)制因子C變體）作為PCNA加載器，具有獨(dú)特的特性，專(zhuān)門(mén)為主鏈DNA聚合酶（Polε）服務(wù)。盡管PCNA加載機(jī)制已經(jīng)被廣泛研究，但Ctf18-RFC如何特異性地識(shí)別并加載PCNA到Polε上的機(jī)制仍不清楚。

為了揭示Ctf18-RFC與Polε之間的特異性加載機(jī)制，研究團(tuán)隊(duì)使用了冷凍電子顯微鏡（cryo-EM）技術(shù)結(jié)合生化實(shí)驗(yàn)進(jìn)行深入研究。他們通過(guò)分析Ctf18-RFC和Polε的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)了它們各自獨(dú)特的結(jié)構(gòu)特征，并探討了這些特征如何協(xié)同作用來(lái)實(shí)現(xiàn)PCNA的特異性加載。

研究發(fā)現(xiàn)，與其他PCNA加載器不同，Ctf18-RFC具有一個(gè)無(wú)序的ATPase馬達(dá)，這個(gè)馬達(dá)依賴(lài)于Polε的結(jié)合來(lái)穩(wěn)定并促進(jìn)PCNA的有效加載。此外，Ctf18-RFC能夠?qū)⒁呀Y(jié)合到DNA上的Polε剝離下來(lái)，然后加載PCNA到DNA上，再將PCNA-DNA復(fù)合物轉(zhuǎn)移回Polε。這種獨(dú)特的加載方式確保了PCNA特異性加載到Polε上。

研究表明，Ctf18-RFC通過(guò)其特有的結(jié)構(gòu)和機(jī)制，實(shí)現(xiàn)了對(duì)Polε的特異性PCNA加載。與其他PCNA加載器不同，Ctf18-RFC的無(wú)序ATPase馬達(dá)和Polε的結(jié)合是實(shí)現(xiàn)這一特異性的關(guān)鍵。通過(guò)這種機(jī)制，Ctf18-RFC不僅能加載PCNA，還能調(diào)控Polε的動(dòng)態(tài)結(jié)合，確保DNA復(fù)制過(guò)程中高效、準(zhǔn)確的PCNA加載。

這項(xiàng)研究揭示了Ctf18-RFC在DNA復(fù)制中發(fā)揮的關(guān)鍵作用，特別是在主鏈DNA合成過(guò)程中PCNA的特異性加載。這一發(fā)現(xiàn)為我們深入理解DNA復(fù)制的分子機(jī)制提供了新的視角，同時(shí)也為研發(fā)潛在的抗癌藥物提供了靶點(diǎn)。由于PCNA加載在DNA修復(fù)和基因組穩(wěn)定性中具有重要意義，未來(lái)的研究可能會(huì)基于這一機(jī)制，開(kāi)發(fā)出新的治療方法，以應(yīng)對(duì)與DNA復(fù)制錯(cuò)誤相關(guān)的疾病。

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